申貝科學儀器

目的

為(wei)保證食品快(kuai)速檢測方(fang)法(fa)評(ping)價(jia)工作科學合理、標準統一(yi)，特制(zhi)定本規(gui)范。

適用范圍

本規范(fan)適(shi)用于食(shi)品(pin)藥品(pin)監管部門組織開展的食(shi)品(pin)（含食(shi)用農(nong)(nong)產(chan)品(pin)）中(zhong)農(nong)(nong)獸藥殘留(liu)、非法添加、真菌毒素、食(shi)品(pin)添加劑、污染物質(zhi)等定性快速檢測方法及相(xiang)關產(chan)品(pin)的技術評價。

評價指標

靈敏度

特異性

假陰性率和假陽性率

與參(can)比(bi)方(fang)法一致性分析

評價方法

低檢出(chu)(chu)水平(ping)（檢出(chu)(chu)限(xian)）設置對(dui)于禁用物質或者(zhe)無殘留*的(de)(de)物質應小于或者(zhe)等于參比方法的(de)(de)檢出(chu)(chu)限(xian)水平(ping)，對(dui)于存在國家標準限(xian)值(zhi)規定的(de)(de)物質應小于或等于限(xian)值(zhi)規定。所有(you)參數需要在不同種類(lei)或者(zhe)類(lei)型的(de)(de)食(shi)品(pin)中(zhong)測定的(de)(de)實際結果進行統計。

靈敏度

靈敏(min)度(du)是指方(fang)法在實驗條(tiao)件下(xia)達到的實際低檢出水平時，檢出陽性結果的陽性樣品(pin)數占總陽性樣品(pin)數的百(bai)分(fen)比(bi)，具體計算要求見附表，評價中可(ke)描(miao)述(shu)為(wei)該百(bai)分(fen)比(bi)下(xia)方(fang)法的檢出限。

特異性

特(te)異性是指(zhi)方(fang)法在實(shi)驗條件下達(da)到的實(shi)際低(di)檢出水平時，檢出陰(yin)性結果的陰(yin)性樣品(pin)數占總陰(yin)性樣品(pin)數的百分(fen)比(bi)，具體(ti)計算要求見附表，評價中可描述為(wei)方(fang)法檢出限下不存在干擾的百分(fen)比(bi)。

假陰性率和假陽性率

假(jia)(jia)陰性率是指方法在實(shi)驗條件下達到的實(shi)際低檢出(chu)水平(ping)時，陽性樣品中檢出(chu)陰性結(jie)果的大概率（以百分比計），具(ju)體(ti)計算要求(qiu)見附(fu)表，計算結(jie)果為方法大假(jia)(jia)陰性率的結(jie)果。

 假(jia)陽性(xing)率是指方(fang)法在實驗條件下達到的(de)實際低檢(jian)出水平時，陰(yin)性(xing)樣(yang)品中檢(jian)出陽性(xing)結果的(de)大(da)概率（以(yi)百分比(bi)計(ji)），具體計(ji)算要求見附表，計(ji)算結果為方(fang)法大(da)假(jia)陽性(xing)率的(de)結果。

與參比方法一致性分(fen)析(xi)

快速檢(jian)(jian)測方(fang)(fang)法(fa)應與方(fang)(fang)法(fa)中規定的參(can)比(bi)方(fang)(fang)法(fa)進(jin)行一致性比(bi)較。與參(can)比(bi)方(fang)(fang)法(fa)一致性分(fen)析統計方(fang)(fang)法(fa)常(chang)見(jian)卡方(fang)(fang)檢(jian)(jian)驗，具體(ti)可見(jian)附表中顯著性差(cha)異（c²）所示，一(yi)般：

c²=（½a-b½-1）²/（a+b）

a：樣品(pin)被(bei)待(dai)確認方法(fa)(fa)證實為陽性而(er)參(can)比方法(fa)(fa)檢(jian)驗為陰(yin)性的數目；

b：樣品被待(dai)確認方(fang)法證實(shi)為陰性而參(can)比(bi)方(fang)法檢(jian)驗為陽性的數目。

c²<3.84表示待確認方法與參比方法的陽性確證比率在95%的(de)置信區間內沒有顯著性(xing)(xing)差異。但是(shi)如果待確認方法比(bi)參比(bi)方法存在(zai)更(geng)高的(de)回收率，則(ze)以(yi)(yi)上(shang)兩種方法的(de)陽性(xing)(xing)確證比(bi)率存在(zai)顯著性(xing)(xing)差異是(shi)可以(yi)(yi)接受的(de)。

c²>3.84表示兩種方法的陽性確認比率在95%的置信區(qu)間內有顯著性(xing)差(cha)異。

如果能夠證實待確認方法靈敏度優(you)于(yu)參比(bi)方法，則兩種(zhong)陽性比(bi)例的顯著性差異可以接受。

在考察與參比方(fang)法的(de)(de)(de)一(yi)(yi)致(zhi)性分析中，也需要考察在檢(jian)出限或(huo)者報告限度水平附近的(de)(de)(de)檢(jian)測(ce)結果與濃度之間(jian)的(de)(de)(de)趨勢一(yi)(yi)致(zhi)性。

5　評價步驟

5.1　擬定評價技術方案

在比較快速(su)檢測(ce)方(fang)法與待評(ping)(ping)價(jia)(jia)方(fang)法的(de)適用(yong)(yong)范圍、性能指標(biao)和要求(qiu)等符合性情況的(de)基(ji)礎上(shang)，評(ping)(ping)價(jia)(jia)機構應(ying)(ying)(ying)針對待評(ping)(ping)價(jia)(jia)食(shi)品(pin)快速(su)檢測(ce)方(fang)法及相(xiang)(xiang)關產品(pin)制定評(ping)(ping)價(jia)(jia)方(fang)案。應(ying)(ying)(ying)包(bao)括但不限于：方(fang)案實施程序、評(ping)(ping)價(jia)(jia)內(nei)容及依據、評(ping)(ping)價(jia)(jia)比較用(yong)(yong)參(can)考限值標(biao)準及方(fang)法標(biao)準、參(can)考樣(yang)品(pin)制備、參(can)考值選(xuan)擇、參(can)考樣(yang)品(pin)定值及依據、參(can)考樣(yang)品(pin)編碼及說明、測(ce)試程序、結(jie)果判斷及統計方(fang)式、結(jie)論出具等，終(zhong)結(jie)論的(de)出具應(ying)(ying)(ying)附相(xiang)(xiang)關判別依據，并給出相(xiang)(xiang)應(ying)(ying)(ying)判別指標(biao)。

盲樣制備

試驗評價需使用盲樣檢測進行。試驗評價盲樣涉及空白、陰性、陽性樣品等均應進行實驗室測定賦值，并出具均勻性和穩定性結果，相應盲樣的均勻性和穩定性測試結果計算的重復性相對標準偏差，應為參比方法要求對應濃度應符合重復性相對標準偏差的1/3。可使用(yong)有證(zheng)標準物質(zhi)、參考(kao)物質(zhi)或者質(zhi)量控制品等進行溯源參考(kao)，測定完成后的各類(lei)樣(yang)品應進行隨機編號(hao)處理，形(xing)成盲樣(yang)。用(yong)于(yu)試驗(yan)評價的盲樣(yang)或者質(zhi)量控制樣(yang)品，可自行制備，應符合(he)：

1)基質符合性(xing)和(he)與實際食(shi)品(pin)樣品(pin)所含物質成(cheng)分相似性(xing)；

2)考慮成(cheng)分存(cun)在的濃度(du)水(shui)平(ping)，應涵(han)蓋涉及產品的檢出(chu)水(shui)平(ping)、標(biao)(biao)準*值（標(biao)(biao)準規定值）、對(dui)應標(biao)(biao)準的檢出(chu)水(shui)平(ping)等，選擇多(duo)個水(shui)平(ping)進行測定；

3) 根據標準方法規定的食(shi)品(pin)(pin)類別或(huo)者評(ping)價范圍適(shi)用的食(shi)品(pin)(pin)，盲(mang)樣制備時(shi)應重點考慮(lv)典型樣品(pin)(pin)基(ji)質(zhi)或(huo)相似基(ji)質(zhi)，結合相關食(shi)品(pin)(pin)類別和測(ce)定目標物(wu)存在形式(shi)，按照(zhao)食(shi)品(pin)(pin)宏(hong)觀組(zu)分(fen)進行(xing)區分(fen)，綜(zong)合考慮(lv)蛋(dan)白、脂肪、水(shui)分(fen)、糖分(fen)、高聚物(wu)或(huo)者多聚體物(wu)質(zhi)、色澤、酸(suan)堿性等影(ying)響檢測(ce)的組(zu)分(fen)進行(xing)區分(fen)選擇，必要時(shi)應按照(zhao)食(shi)品(pin)(pin)生產工藝制備添加樣品(pin)(pin)；

4)對(dui)于多種成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)檢測，應選(xuan)擇(ze)其分(fen)(fen)析成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)進行(xing)分(fen)(fen)類比較（結構類似程(cheng)度(du)、危害程(cheng)度(du)等），綜合選(xuan)擇(ze)幾種代表(biao)性(xing)成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)進行(xing)評(ping)價(jia)；對(dui)于易于獲(huo)得的成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)組合，盡可能(neng)考慮全部進行(xing)試驗評(ping)價(jia)；

5)盲(mang)樣(yang)測定方式按照單位樣(yang)品量以(yi)及(ji)添加目(mu)標物的情況，樣(yang)品處(chu)理(li)可以(yi)采(cai)用(yong)部(bu)分樣(yang)品、全量處(chu)理(li)等方式進(jin)(jin)行。盲(mang)樣(yang)必須進(jin)(jin)行批內(nei)均勻性檢(jian)查(cha)，對于一定時間(jian)范(fan)圍(wei)內(nei)檢(jian)測的樣(yang)品，需要(yao)進(jin)(jin)行穩定性檢(jian)查(cha)，保證在評(ping)價期限內(nei)樣(yang)品穩定，以(yi)上(shang)均需評(ping)價機(ji)構提供檢(jian)測報告(gao)。

5.3　試驗測試

5.3.1 試驗評價可按(an)照方法前期驗證結果（如有），進行濃度(du)水平(ping)和(he)基質設計(ji)，應比較空白檢(jian)(jian)測、對(dui)照檢(jian)(jian)測、標準方法平(ping)行對(dui)照檢(jian)(jian)測等(deng)(deng)內容，附(fu)帶(dai)考察方法操作環境、方法用時、操作難易等(deng)(deng)情況；對(dui)于多檢(jian)(jian)測規(gui)(gui)格產品(pin)，應根據其實際規(gui)(gui)格制定具(ju)體(ti)評價濃度(du)范(fan)圍(wei)(wei)和(he)水平(ping)，并在結果判斷(duan)中注明適用檢(jian)(jian)測范(fan)圍(wei)(wei)。

5.3.2 評價(jia)應進(jin)行(xing)(xing)雙(shuang)盲(mang)檢(jian)(jian)測(ce)，對(dui)(dui)待評價(jia)食(shi)品(pin)快速檢(jian)(jian)測(ce)方(fang)法和(he)用(yong)于比較的參(can)比方(fang)法平(ping)(ping)行(xing)(xing)利(li)用(yong)盲(mang)樣(yang)進(jin)行(xing)(xing)測(ce)試(shi)，并對(dui)(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)行(xing)(xing)平(ping)(ping)行(xing)(xing)測(ce)定，分別計算(suan)獲得平(ping)(ping)均(jun)檢(jian)(jian)測(ce)結果，用(yong)于方(fang)法間一致性(xing)評價(jia)，檢(jian)(jian)測(ce)過程中應利(li)用(yong)根據檢(jian)(jian)測(ce)物(wu)在(zai)食(shi)品(pin)中實(shi)(shi)際可能存(cun)在(zai)的水平(ping)(ping)，設置(zhi)質(zhi)量(liang)控制樣(yang)品(pin)，考察檢(jian)(jian)測(ce)穩(wen)定性(xing)。實(shi)(shi)驗中測(ce)試(shi)樣(yang)品(pin)包括但不限于：

1) 食品基質空白樣品；

2) 測試水平一般應包括標準方法檢出水平（或者標準*值）的0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區分的水平（不少于3個）；或者方法標稱檢出限0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區分的水平（不少于3個）；

3) 依據相關分析檢測統計計量要求，一般檢測樣品每種基質空白及每個濃度水平不得少于50例，對于非法添加等重點項目的檢測，可考慮在低濃度水平設置為100例，以(yi)便更好(hao)地評價(jia)出(chu)假陽性率和假陰(yin)性率；

4) 如存在或易(yi)獲(huo)得，應進行陽性(xing)樣品復核(he)測試；

5) 針(zhen)對多成(cheng)分(fen)方法，每種典(dian)型(xing)物質均需有檢(jian)測結(jie)果和相(xiang)應(ying)評價參數結(jie)果；

6) 應(ying)給出差異比較結果(guo)，具備(bei)數值的應(ying)有統計識(shi)別(bie)結論，統計方法可根據(ju)實際(ji)情況進行設定(ding)，但需說明(ming)理由。

評價結果及報告出具

評價結果

評價結果應計算快速檢測方法可檢出限度水平的靈敏度、特異性、假陰性率、假陽性率以及檢測結果與參與方法的一致性。一般可考慮（但不限定）每個基質每個濃度水平應在數據采集數不少于50例情況下，獲得假(jia)陰性率和假(jia)陽性率的(de)結果。食品快(kuai)速檢(jian)測方法技(ji)術評(ping)價(jia)機構(gou)應根(gen)據項目實際(ji)情況給出上述(shu)指(zhi)標評(ping)價(jia)結果，并(bing)提(ti)供具有統(tong)計(ji)意(yi)義(yi)的(de)說明。

報告出具

**技(ji)術(shu)評(ping)(ping)價機構(gou)應(ying)出(chu)具(ju)技(ji)術(shu)評(ping)(ping)價報告，對(dui)評(ping)(ping)價整體情況(kuang)和結(jie)果進行匯總整理和分析(xi)，報告中(zhong)應(ying)有被(bei)評(ping)(ping)價的(de)食品(pin)快速檢測方法(fa)或(huo)相(xiang)關產品(pin)是否符合國家有關規(gui)定(ding)或(huo)產品(pin)標稱的(de)結(jie)論。

附表(biao)：快速檢測(ce)方法性能指標計算表(biao)

附表

快速檢測方法性能指標計算表